Protein foszfatáz-1 szerepe a retinoblasztóma fehérje foszforilációs szintjének szabályozásában

Nyomtatóbarát változatNyomtatóbarát változat
Konferencia: 
2010/2011. tanév
Tagozat: 
Molekuláris biológia, Fejlődésbiológia, Genetika, Bioinformatika, Genomika
Előadó szerző adatai
Név (format for foreign students: Last Name, First Name): 
Gaál Zsuzsanna

Előadás adatai

Előadás címe: 
Protein foszfatáz-1 szerepe a retinoblasztóma fehérje foszforilációs szintjének szabályozásában
Összefoglaló: 

A retinoblasztóma fehérje (pRb) foszforilációja/defoszforilációja egyike a sejtciklust szabályozó fontos mechanizmusoknak. E mechanizmus számos esetben zavart szenved a tumoros transzformációk esetében, amikor a retinoblasztóma fehérje hiperfoszforilációja nagymértékben hozzájárul a daganatos sejtek kontrollálatlan proliferációjához. A pRb foszforilációs szintjét a ciklin függő protein kinázok és a defoszforiláló foszfatázok aktivitásának aránya szabja meg. Korábbi eredmények a protein foszfatáz-1 (PP1) szerepére utaltak a pRb defoszforilációjában, azonban a PP1 katalitikus alegység (PP1c) expresszió, ill. PP1-gátló fehérjék szabályozó funkcióit még nem vizsgálták. Célunk az volt, hogy különböző sejtvonalakat használva tanulmányozzuk a PP1 szerepét a pRb defoszforilációjában.
A PP1 katalitikus alegység (PP1c) csendesítését eredményező gátló RNS HeLa sejtekben csökkentette a PP1c mennyiségét és ezzel párhuzamosan a pRb növekvő foszforilációját eredményezte, ami a PP1c alapvető szerepére utal a defoszforilációban. Mivel korábbi eredmények a PP1c-t tartalmazó miozin foszfatáz (MP) holoenzim szerepét is felvetették a pRb defoszforilációjában, ezért a KEPI nevű MP gátló fehérje expressziójának hatását is tanulmányoztuk a pRb defoszforilációjára. A Flag peptiddel kapcsolt KEPI fehérjét MCF7 emlőtumor sejtvonalban expresszáltuk és kimutattuk a Flag-KEPI foszforilációját, amellyel párhuzamosan a pRb foszforilációjának növekedését tapasztaltuk megerősítve ezzel a PP1 szerepét a defoszforilációban. Feltételezzük, hogy a KEPI-hez hasonló foszfatázgátló szekvenciarészleteket tartalmazó LIM-kináz is PP1c gátló fehérje lehet. Flag-LIM-kinázt közepes hatékonysággal expresszáltunk HeLa sejtekben, amelynek következményeként a sejtek foszfatáz aktivitása csökkent, a pRb foszforilációjának mértéke pedig növekedett, azt sugallva, hogy a LIM-kináznak is lehet szerepe a PP1 aktivitásának szabályozásában.
Eredményeink arra utalnak, hogy a pRb defoszforilációjáért a PP1 enzimtípus a felelős, és a PP1 aktivitása sokoldalúan szabályozható gátló fehérjékkel.

1. témavezető adatai
Név: 
Erdődi Ferenc
Intézet / Tanszék/ Klinika: 
Orvosi Vegytani Intézet
2. témavezető adatai
Név: 
Kiss Andrea
Intézet / Tanszék/ Klinika: 
Orvosi Vegytani Intézet
Díj: 
2. díj

Támogatók: Támogatók: Az NTP-TDK-14-0007 számú, A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése helyi konferencia keretében, az NTP-TDK-14-0006 számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása, NTP-HHTDK-15-0011-es A Debreceni Egyetem ÁOK TDK tevékenység népszerűsítése 2016. évi helyi konferencia keretében, valamint a NTP-HHTDK-15-0057-es számú, A Debreceni Egyetem Népegészségügyi Karán folyó Tudományos Diákköri kutatások támogatása című pályázatokhoz kapcsolódóan az Emberi Erőforrás Támogatáskezelő, az Emberi Erőforrások Minisztériuma, az Oktatáskutató és Fejlesztő Intézet és a Nemzeti Tehetség Program