Mesenchymális őssejtek differenciációjának tanulmányozása

A mesenchimális őssejtek (MSC) multipotens sejtek, melyek különböző transzkripciós és morfogén faktorok hatására képesek csont-, zsír- illetve porcsejtekké differenciálódni. Kísérleteink során célunk a differenciációt szabályozó faktorok tanulmányozása és a poli-ADP-ribóz polimeráz (PARP) szabályozó szerepének feltérképezése volt. A PARP az MSC differenciáció mesterregulátor fehérjéivel történő interakciója révén betöltött szabályozó funkcióját korábbi kísérleteink támasztják alá. Kísérleteink során placentából izolált sejteket használtunk. Mintavétel a 0., 3., 5., 7. és 10. napon történt. Eredményeink azt mutatják, hogy az izolált sejtek az MSC-re jellemző CD73, CD90, CD105 pozitív sejtfelszíni markereket hordozzák és negatívak CD34, CD45, vWF és HLA G sejtfelszíni antigénre. A sejtkultúrákat funkcionálisan is jellemeztük: csont, porc és zsír irányban sikeresen differenciáltattuk a sejteket. A csontdifferenciáció során kalcium depozíciót és alkalikus foszfatáz aktivitást detektáltunk. Zsírdifferenciáció során megnövekedett lipidfelhalmozódást tapasztaltunk a differenciáltatott kultúrákban. A porcdifferenciációt az aggrekán és SOX9 chondrogén differenciációs markerek immunhisztokémiai detektálásával igazoltuk. Mindhárom differenciációs kultúrán PJ34 (specifikus PARP1 gátlószer) adásával PARP gátlást is végeztünk. Előzetes eredményeink alapján a PARP gátlás főleg az osteogén differenciációt gátolta, míg az adipogén és chondrogén differenciációra kifejtett hatása mérsékeltebb volt. Összefoglalásként elmondhatjuk, hogy a placenta megfelelő forrás funkcionális humán MSC sejtek izolálására és az MSC sejtek osteogén differenciációjában a PARP enzimeknek szabályozó szerepük van. További célunk e szabályozás molekuláris mechanizmusának megismerése.