Protein foszfatáz 2A szerepének vizsgálata a WM35 és HT168 melanoma sejtek jelátvitelében

A melanoma malignum cutis az epidermis stratum basale sejtjei között elhelyezkedő, crista neuralis eredetű melanocyták malignus elváltozásával jön létre, genetikai és külső tényezők hatására- főként krónikus UV-expozíció- malignusan transzformálódhatnak. Eközben számos jelátviteli útvonal módosulhat, a sejtek felszínén lévő receptorösszetétel és a sejtek morfológiája is megváltozik. A melanoma kifejezett metasztázis képzési hajlammal rendelkezik és az áttétes melanomák szinte teljesen rezisztensek a ma ismert daganatterápiás eszköztár beavatkozásaira.
A Ser/Thr-specifikus kinázok aktivitása révén foszforilált fehérjék defoszforilálását a foszfo-Ser/Thr-specifikus protein foszfatázok (PP) katalizálják. A PP2A alosztályba tartozó foszfatáz 20 nM koncentrációjú okadainsavval specifikusan gátolható. Számos tumor kialakulása során a PP2A egyes alegységeinek génjei is mutációkon mehetnek keresztül, mely tumorszupresszor hatással is bírhat. Kísérleteink során célul tűztük ki, hogy a PP2A okadainsavval történő farmakológiai gátlásának két eltérő biológiai viselkedésű humán melanoma sejtvonal jelátviteli útvonalaira kifejtett hatását vizsgáljuk. A HT168 egy agresszív, nagy mértékben metasztatizáló, míg a WM35 egy metasztázist nem adó, de invazív primer melanomából izolált humán sejtvonal. A PP2a farmakológiai gátlása morfológiai változásokat okozott a sejtvonalakban. Mindkét sejtvonal sejtjeiben igazoltuk a PP2A jelenlétét, illetve aktivitásának gátolhatóságát okadainsavval. RT-PCR-ral nyomonkövetve az ERK, PKA, CREB és a Sox9 mRNS változásait nem tapasztaltunk lényeges eltéréseket. Az említett enzimek és transzkripciós faktorok fehérje expresszióját megvizsgálva viszont jelentős expressziós növekedést detektáltunk. A CREB és a Sox9 transzkripciós faktorok foszforilált formájának expressziója megemelkedett és nukleáris jelenlétük fokozódott.
Az általunk végzett kutatások eredményei adalékot jelenthetnek a melanoma szignalizáció pontos leírásában, egyúttal segíthetik a megfelelő farmakológiai terápiák fejlesztését, melyek segítségével reményeink szerint nagyobb eséllyel vehetjük fel a harcot ezen agresszív tumor kezelése során.
Támogatók: OTKA CNK 80709